长时(shí)间的仿生栽(zāi)培和生态研究,使得羊(yáng)肚菌的(de)发(fā)生规律和生(shēng)理需求逐渐为(wéi)人们所掌握。一些羊肚菌爱好(hǎo)者(zhě)和科技工作者开始(shǐ)意识到菌种在羊肚(dù)菌驯(xùn)化栽(zāi)培中的重要性(xìng)。这(zhè)是从仿生栽培向人工栽培的重(chóng)要转变(biàn)。
菌种的驯化(huà)选(xuǎn)育、补料(liào)技术(shù)和人(rén)为刺激诱(yòu)发(fā)出菇(gū)是羊肚菌人工(gōng)栽培区(qū)别于仿生(shēng)栽(zāi)培的重要(yào)标志(zhì)。
实际上,20世(shì)纪80年代,美(měi)国科学家Ower就(jiù)模拟自然环境(jìng)在实验室内成功(gōng)实现(xiàn)了羊肚菌出(chū)菇[33~36],随后由其合作者Mills进行了相对成功的工(gōng)厂化栽培应用[4]。
无论是民间(jiān)还是官(guān)方资料都显示,我国的羊肚菌人工栽培技术(shù)都明显晚于Ower的技术专利(lì)。
蔡知桂等(děng)在2010年公布了一(yī)种羊肚菌栽培(péi)技术专利[37],技术流(liú)程依次(cì)为栽培(péi)种(zhǒng)的制作、培养料(liào)的制(zhì)备(bèi)、播种、发菌(jun1)管理及出(chū)菇(gū)管理等(děng)。值得注意(yì)的是,该(gāi)专利要求(qiú)在菌丝成熟之前至少进行(háng)一次营养液补充,这可以认(rèn)为(wéi)是羊肚(dù)菌(jun1)仿(fǎng)生(shēng)栽(zāi)培(péi)向纯(chún)人工栽培的(de)过渡。赵琪(qí)等(děng)公布(bù)了一种梯(tī)棱羊(yáng)肚(dù)菌栽培(péi)方案和菌种制作方案的专利技(jì)术,首次提(tí)及(jí)所(suǒ)用的菌种是(shì)经过分子鉴定的梯(tī)棱羊肚菌(M.importuna)[38,39]。
2.1 菌(jun1)种的选择
羊肚菌(jun1)子囊果(guǒ)具有明显的形态可塑(sù)性,因此其物种(zhǒng)的鉴定一直是一(yī)个难题(tí)。早期对
羊肚菌菌种的选择和确定大(dà)多根(gēn)据形态特征(zhēng),保留下(xià)来的(de)模式标本和数据(jù)资料有(yǒu)限,因此(cǐ),很难推定早期资(zī)料中的所用品种和现代分类系统(tǒng)的对应关系。近年来,应用分(fèn)子系(xì)统(tǒng)发育学鉴定羊(yáng)肚菌物种(zhǒng)得(dé)到广泛的认(rèn)可[40~43]。王波和鲜灵(líng)对四川(chuān)大邑县、崇州市、郫县和涪城区的人工栽(zāi)培品种进行形态特征的详细描述和分子鉴定,结果发现,所有羊肚(dù)菌品种的(de)ITS-DNA序(xù)列与数据库中梯棱(léng)羊(yáng)肚菌相似度达100%,而与(yǔ)羊肚菌属的(de)其他物种相差甚远[44]。赵琪等(děng)在公开(kāi)的羊(yáng)肚菌栽培(péi)专利中指出,所用(yòng)的品(pǐn)种(zhǒng)为梯棱羊(yáng)肚(dù)菌[38,39]。
自2012年起,我们在全国各地进行羊(yáng)肚菌的驯化栽培和标(biāo)本采集整理(lǐ)工作,随后对来源清(qīng)晰的4个商业(yè)推广菌株羊(yáng)肚菌1号、3号、6号和7号(hào)进行了详细的形态(tài)特征记录和(hé)DNA序(xù)列分(fèn)子鉴定分析。结(jié)果表明,羊肚菌1号(hào)和3号是梯棱羊肚菌,6号为六妹羊肚菌(M.
sextelata),7号(hào)为七妹(mèi)羊肚菌(M.septimelata),均(jun1)属于黑色(sè)羊肚菌支系[43]。其(qí)他品(pǐn)种是否可用于驯化栽(zāi)培(péi)有待进行深(shēn)入研(yán)究,建议生产者在开展羊肚菌人(rén)工栽培(péi)时,应定向采集(jí)当前已经应用的品种,经初筛、小试和中试后(hòu),再进行大面积的示范性栽培和推广。
2.2 补料技术
在有目的有意识驯化(huà)菌种的(de)基础上,“外源营养袋”的出现和(hé)广泛使用促进了羊肚菌产业的健(jiàn)康(kāng)发展,外源营(yíng)养袋技(jì)术是羊(yáng)肚菌(jun1)生产环节中的最重(chóng)要技术处理,是羊肚菌丰产的最(zuì)重要“能量”支(zhī)撑。
Ower曾详细论(lùn)述外(wài)源营养(yǎng)袋(dài)的技术原理(lǐ)和制(zhì)作工艺,但在随后的推广应用中,并未被重视和使用(yòng)(注:Ower于1986年逝世,后期的推(tuī)广由合(hé)作者Mills进行)。Ower对其原(yuán)理和适用方法(fǎ)的解释是羊肚(dù)菌需(xū)要在营养相对贫(pín)乏的(de)环境(jìng)中才(cái)能进行有(yǒu)性生殖,而其菌丝自身(shēn)储(chǔ)备的能量不足以支撑其有(yǒu)性(xìng)生殖过程,因此需(xū)要从外界吸收新(xīn)的营养物质,同时需要(yào)在生产后期对新(xīn)的(de)营养(yǎng)物质予以移除,以使菌丝重新回到营养贫乏状态转而(ér)进行(háng)有性生殖。Ower利用培养菌核的(de)培养料作为“外源性营养物(wù)”进行(háng)补料操作[34~36]。
我国谭方河先生最早使用外源营养袋技(jì)术(shù)[4]。约(yuē)2000年前后,出于“不同菌丝的(de)配合(hé)”(不同“极性”的菌(jun1)丝杂(zá)合)可能有助于出菇的认识,在菌丝(sī)萌发后,他采取(qǔ)在菌床上扣(kòu)上接种有另一类(lèi)型(xíng)羊肚菌菌种的(de)菌袋,以实现两种菌丝的融合,诱发出(chū)菇,此方法比不“杂交”具(jù)有明显的增产效果,该技术(shù)在(zài)早期曾被称为“菌丝融合技术”。随后,谭方河先生又发现(xiàn),只扣料(liào)袋(不接种)同样可以(yǐ)促(cù)进增产,因此就推(tuī)翻(fān)了“菌(jun1)丝融合的说法”,进而发(fā)展成(chéng)为现今的外源营养(yǎng)袋技术(shù)。
2.3 保(bǎo)育催菇
催菇是羊(yáng)肚菌栽培的重要环节,技术性较强,其目(mù)的是创造不利于(yú)羊肚菌(jun1)继续营养生长(zhǎng)的条(tiáo)件,使其转向生殖生长,其中包括营养(yǎng)、水(shuǐ)分、湿度、温度、光线等刺激。
①营养刺激是(shì)指通过移除营养实现(xiàn)营养刺激,该技术(shù)也是Ower专(zhuān)利中强(qiáng)调的环节(jiē),可行的操作是,外源营养袋施放后20~25天(tiān)移除外源营养袋[34~36]。
②水分刺激(jī)是自然界大型真(zhēn)菌出菇的(de)重要条件。水分可冲刷(shuā)真菌分泌的(de)各种酶类物质,改变菌(jun1)丝渗透压,也是菌丝转向生殖生长所需要湿润环境的重要(yào)保证。具体做法是:撤袋(dài)之后,大水(shuǐ)浇灌,至地面完(wán)全(quán)湿透[1]。
③湿度控制(zhì)包括土壤含水(shuǐ)量和空气相(xiàng)对湿度,水分(fèn)刺激使土壤含水量达到(dào)饱和,随后控制土(tǔ)壤水分在20%~30%,原基(jī)发生前空气湿度在(zài)85%~95% [1]。
④目前没有数据直接支持温差(chà)刺激实(shí)现羊肚菌的生殖生长,但大量数据表明,10 ℃左右的昼夜温差,有助(zhù)于(yú)羊肚菌出菇。主要通过白天闭棚增温(wēn),晚间掀开棚通风降温以加大(dà)温(wēn)差[1]。
⑤栽培经验表明,光线也是(shì)影(yǐng)响出菇的(de)一个重要指标,过强会抑制出菇(gū),可行的操作是使用(yòng)4~6针的(de)遮阳网进行遮阴处理。